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扩繁

目前小鼠品系已达上万种,大鼠品系也超过上千种,这些品系的繁殖性能千差万别,需要根据具体品系的特点,针对性的优化种群管理方案。依托20年的大小鼠种群管理经验和完善的动物设施质控体系,米乐m6app下载安卓可以根据客户需要,制定合适的扩繁方案,提供品系建立、常规扩繁、快速扩繁和活体保种等专业服务。

 

1. 品系建立

大小鼠,按照育种方式不同,分为近交系和封闭群。JAX将遗传背景不清楚的;或者首建鼠(Founder)来源于3种或以上品系;或者首建鼠是远交系(Outbred),统称为群(STOCK)。比如,STOCK按照全同胞兄妹交配20代之前,仍称为STOCK;兄妹交配20代之后,称为近交系(Inbred)。


术语

定义和说明

STOCK(群)

一个独立的繁育群体。

Line(系)

谱系明确的一群动物,且来源于同一父母。

Inbred strain(近交系)*

至少连续20代兄妹交配培育而成的品系。所有动物都可追溯于同2只首建鼠。

Subline(亚系)

按照近交系标准独立于原近交系繁育的一群小鼠。如许多常见近交系的亚系(C57BL/6J,   C57BL/6N)。

Coisogenic(同类系)

有一个基因改变的近交系。如许多在近交系上进行基因修饰操作后获得的品系。

Inbred substrain(近交亚系)*

按照近交系标准繁育20代的亚系,或者已经明确与近交系的遗传区别(甚至是1个基因的区别)。

对于随机转基因和CRISPR技术产生的敲除鼠,由于插入位点/删除碱基数/拷贝数的不同,每一只founder(F0)的基因和表型可能不同。米乐m6app下载安卓可以为客户提供标准的品系建立服务,筛选到符合实验需要的基因编辑模型(品系,见下图,源于JAX)。


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2. 快速扩繁

采用超数排卵的方法获得卵母细胞,通过新鲜或冷冻精子进行体外受精(IVF),将2-cell时期的受精卵胚胎移植到代孕小鼠体内,一代获得大量子代小鼠的过程。


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(1) 快速扩繁服务优点:

-只需要提供精子或少量雄性小鼠;

-6~12周即可提供大量同批次后代;

-基因敲除或CKO小鼠繁育周期缩短30~50%。


序号

仔鼠数量

快速扩繁时间

传统扩繁时间

1

30只后代

6周

24周

2

50只后代

6~8周

24周

3

100只后代

8~10周

32周

4

150只后代

8~12周

40周

5

200只后代

8~12周

46周

*数据源于B6背景小鼠


(2)科学经济扩繁方案制定:

按照计划扩繁,获得足够数量的大小鼠模型,是确保实验进行的前提。米乐m6app下载安卓主要依据大小鼠的扩繁性能和行业认可的扩繁性能计算公式,制定科学经济的扩繁方案。

(1)基本生理参数:

-小鼠6~8周左右性成熟,大鼠8~10周左右性成熟

-小鼠孕期约3周(19~21天);大鼠孕期约3.2周(22~25天)

-首胎间隔4~6周。

-小鼠传一代需要3个月左右。

(2)影响扩繁速度的雌雄鼠因素:

①雄鼠,精子数量多,只要具有受精能力,一般不是限速因素;

②雌鼠,孕期3周,哺乳3~4周,窝间隔一般1.5~2个月,常常是限速因素。

(3)基因型杂合鼠的快速扩繁

使用基因阳性的雄鼠,与同背景的野生雌鼠卵(超排获得卵)作IVF快速扩繁,2个月左右即可获得100只以上的后代(根据实验需要,移植对应数量的受精卵2-cell期胚胎)。

(4)基因型纯合的快速扩繁

如果有大量的纯合基因阳性雌鼠,可以直接自然扩繁或作IVF扩繁。一般情况下没有纯合或杂合的基因阳性雌鼠,只能使用野生型雌鼠超排,作IVF获得F1杂合后代;然后到F2代才能获得纯合鼠。

(5)多基因快速扩繁

由于快速扩繁,依赖于订购大量的野生型同背景雌鼠获取卵进行IVF,即在1代时间内可以获得大量的杂合小鼠。对于多基因扩繁,情况会比较复杂多样,会根据客户需求(时间和成本),提供适合的方案。


3.活体保种

若短时间内不用大小鼠模型,也可以小规模的活体保种。根据发育性能,基因型,繁育周期,进行科学的留种和换种计划,避免出现不育,以最小的笼位数维持种群。一般小鼠2~4笼;大鼠3~5笼进行活体保种。